Compuestos fenólicos de Tagetes lucida Cav. con efecto antibacteriano por daños a la membrana / Phenolic compounds of Tagetes lucida Cav. with antibacterial effect due to membrane damage

Tagetes lucida Cav. (Asteraceae = Compositae) se usa para tratar infecciones estomacales. El estudio se centró en evaluar la composición y el efecto antimicrobiano de un extracto de T. lucida Cav. La planta se extrajo con etanol al 10% p/v, y la composición del extracto se analizó por Rp-HPLC-MS. El efecto antibacteriano se evaluó contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Salmonella choleraesuis utilizando métodos de difusión por disco, microdilución y bioautografía. Los ensayos de sytox y cometa fueron utilizados para evaluar el mecanismo de acción. De esta forma, se detectaron nueve compuestos fenólicos en el extracto de T. lucida. El extracto exhibió actividad solo en S. aureus (MIC de 4.000 mg/ml). La bioautografía reveló que los compuestos fenólicos podrían actuar sinérgicamente. Las pruebas de sytox y cometa mostraron una acción antibacteriana del extracto sobre la membrana bacteriana y el ADN de esta cepa bacteriana.

Tagetes lucida Cav. (Asteraceae=Compositae) is used for treating stomach infections. The study focused on evaluating the composition and antimicrobial effect of an extract of T. lucida Cav. The plant extracted with ethanol at 10% w/v, and the extract composition analyzed by Rp-HPLC-MS. The antibacterial effect was evaluated against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, and Salmonella choleraesuis using disk diffusion, microdilution and bioautography methods. The sytox and comet assays were used to evaluate the mechanism of action. In this way, nine phenolic compounds were detected in the extract of T. lucida. The extract exhibited activity only on S. aureus (MIC of 4.000 mg/ml). The bioautography revealed that the phenolic compounds could act synergistically. The sytox and comet tests showed an antibacterial action of the extract on the bacterial membrane and DNA of this bacterial strain.

Native yeasts for alternative utilization of overripe mango pulp for ethanol production / Levaduras nativas para la utilización alternativa de pulpa de mango senescente para la producción de etanol

Mango fruits (Mangifera indica L.) are highly perishable, causing postharvest losses and producing agroindustrial waste. In the present work, native yeasts were used to evaluate ethanol production in overripe mango pulp. The two isolated strains showed similar sequences in the 18S rDNA region corresponding to Kluyveromyces marxianus, being different to the data reported in the NCBI database. Values of up to 5% ethanol (w/v) were obtained at the end of fermentation, showing a productivity of 4g/l/day, a yield of up to 49% of ethanol and a process efficiency of 80%. These results represent a viable option for using the surplus production and all the fruits that have suffered mechanical injury that are not marketable and are considered as agroindustrial waste, thus achieving greater income and less postharvest losses.

Las frutas de mango (Mangifera indica L.) son altamente perecederas, lo cual causa pérdidas poscosecha y produce desechos agroindustriales. En el presente trabajo, se utilizaron 2 levaduras nativas para evaluar la producción de etanol en pulpa de mango senescente. Las 2 cepas aisladas mostraron similitud en la región 18S ADNr, correspondiente a Kluyveromyces marxianus, la cual es diferente a lo reportado en la base de datos del NCBI. Se obtuvieron valores de hasta el 6% de etanol (v/v) al final de la fermentación, con una productividad de hasta 4g/l/día, un rendimiento de hasta 49% de etanol y una eficiencia en el proceso fermentativo del 80%. Esto representa una opción viable para utilizar excedentes de producción o frutos que han sufrido daño mecánico y no son comercializables, al lograr más ingresos y menos pérdida poscosecha.

Búsqueda de biomarcadores a partir de péptidos expresados en biopsias de cáncer de mama / Search for biomarkers from peptides expressed in breast cancer biopsies / Busca de biomarcadores a partir de peptídeos expressos em biópsias câncer de mama

El cáncer de mama (CM) es una de las principales causas de muerte en México. Se ha observado un incremento en la incidencia de éste en mujeres de 15-29 años. A fin de comprender las causas en el desarrollo del CM, se pretendió buscar la asociación entre los genes/enfermedad empleando técnicas de Biología Molecular. Se analizaron, por genómica funcional, 50 biopsias frescas de pacientes con CM (BFCM), 50 biopsias embebidas en parafina de CM (BEPCM) y 10 biopsias frescas de pacientes con sospecha de CM (BFSC), obtenidas de mujeres que residen en Coahuila, México. Las muestras proteicas se cuantificaron y se resolvieron en geles de poliacrilamida dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) y en dos dimensiones (2-DE). El perfil proteico de las BFCM, BEPCM versus BFSC mostró diferencias entre las bandas peptídicas observadas en los geles. Aquellos péptidos que se diferenciaron por su expresión fueron analizados por cromatografía líquida acoplada a masas en tándem (LC/ MS/MS). Las huellas peptídicas obtenidas, a su vez, se analizaron por medio del banco de genes (PubMed). Se encontraron, en las muestras de cáncer, proteínas asociadas a migración celular, supresión de tumores, estrés oxidativo y choque térmico. Por último, estos hallazgos se confirmaron empleando inmuno-electro transferencia o Western blot (WB) con anticuerpos contra vimentina.

Breast cancer (BC) is one of the leading causes of death in Mexico. Moreover, BC is the main cause of death in women between 15-29 years old in northern Mexico. Proteomic techniques have been used in order to achieve a better understanding of the genes involved in the development of BC. The proteins in BC extracted from 50 fresh breast cancer tissues (FBCT), 50 paraffin embedded breast cancer tissues (PEBCT) and 10 biopsies from women suspected of cancer (SC), residing in Coahuila, Mexico were analyzed in this paper. The quantity of protein extracted was similar in both samples FBCT and PEBCT. However, protein quality was lower in PEBCT than FBCT. Subsequently, these proteins were resolved in SDS-PAGE and 2DE. Differences were noticed in protein profile and all those suspect proteins were analyzed by LC/MS/MS. Amino acidic fingerprint allowed for the identification of peptides associated with a) cell migration, b) tumor suppression, c) oxidative stress or heat shock.

O câncer da mama (CM) é uma das principais causas de morte no México. Observou-se um aumento na incidência desse câncer em mulheres entre os 15-29 anos de idade. Para compreender as causas do desenvolvimento de CM, visou-se encontrar a associação entre os genes/doença utilizando técnicas de Biologia molecular. Analisaram-se por genômica funcional, 50 biópsias frescas de pacientes com CM (BFCM), 50 biópsias embebidas em parafina (BEPCM) e 10 biópsias frescas de pacientes com suspeita de CM (BFSC), obtidas de mulheres residentes em Coahuila, México. As amostras de proteínas foram quantificadas e separadas em géis de poliacrilamida dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) e em duas dimensões (2-DE). O perfil proteico das BFCM, BEPCM comparado com BFSC mostrou diferenças entre as bandas peptídicas observadas nos géis. Esses peptídeos que diferem em sua expressão foram analisados por cromatografia líquida acoplada a massas em tandem (LC/MS/MS). As pegadas peptídicas obtidas, por sua vez, foram analisadas utilizando o banco de genes (PubMed). Verificaram-se nas amostras de câncer, proteínas associadas à migração celular, supressão de tumores, estresse oxidativo e choque térmico. Finalmente, estes achados foram confirmados utilizando a imuno-eletro transferência ou Western Blot (WB) com anticorpos contra vimentina.

Efecto de las diferentes fuentes de polifenoles sobre la eficiencia de liberación de ácido elágico por Aspergillus niger / Effect of different polyphenol sources on the efficiency of ellagic acid release by Aspergillus niger

Fungal hydrolysis of ellagitannins produces hexahydroxydiphenic acid, which is considered an intermediate molecule in ellagic acid release. Ellagic acid has important and desirable beneficial health properties. The aim of this work was to identify the effect of different sources of ellagitannins on the efficiency of ellagic acid release by Aspergillus niger. Three strains of A. niger (GH1, PSH and HT4) were assessed for ellagic acid release from different polyphenol sources: cranberry, creosote bush, and pomegranate used as substrate. Polyurethane foam was used as support for solid-state culture in column reactors. Ellagitannase activity was measured for each of the treatments. Ellagic acid was quantified by high performance liquid chromatography. When pomegranate polyphenols were used, a maximum value of ellagic acid (350.21 mg/g) was reached with A. niger HT4 in solid-state culture. The highest amount of ellagitannase (5176.81 U/l) was obtained at 8 h of culture when cranberry polyphenols and strain A. niger PSH were used. Results demonstrated the effect of different polyphenol sources and A. niger strains on ellagic acid release. It was observed that the best source for releasing ellagic acid was pomegranate polyphenols and A. niger HT4 strain, which has the ability to degrade these compounds for obtaining a potent bioactive molecule such as ellagic acid.

La hidrólisis fúngica de los elagitaninos produce ácido hexahidroxidifénico, considerado como una molécula intermedia en la liberación de ácido elágico. El ácido elágico tiene importantes y deseables propiedades benéficas para la salud humana. El objetivo de este trabajo fue identificar el efecto de la fuente de elagitaninos sobre la eficiente liberación de ácido elágico por Aspergillus niger. La liberación de ácido elágico se realizó con tres cepas de A. niger (GH1, PSH y HT4) en presencia de diferentes fuentes de polifenoles (arándano, gobernadora y granada), usadas como sustrato. Se empleó espuma de poliuretano como soporte para el cultivo en estado sólido en reactores en columna. Se midió la actividad elagitanasa a cada uno de los tratamientos. El ácido elágico liberado se cuantificó por cromatografía líquida de alta resolución. Cuando se utilizaron los polifenoles de granada, se alcanzó un valor máximo de 350,21 mg/g de ácido elágico con A. niger HT4 en cultivo en estado sólido. La mayor actividad elagitanasa (5176.81 U/l) se obtuvo a 8 h de cultivo cuando se usaron los polifenoles de arándano como sustrato y A. niger PSH. Los resultados demostraron el efecto que tiene la fuente de polifenoles y la cepa de A. niger en la liberación de ácido elágico. Se observó que la mejor fuente para la liberación de ácido elágico fueron los polifenoles de granada y que la cepa A. niger HT4 posee la habilidad de degradar estos compuestos para la obtención de potentes moléculas bioactivas, como el ácido elágico.

Growth Inhibition of Some Phytopathogenic Bacteria by Cell-Free Extracts from Enterococcus sp.

Aims: To inhibit of bacterial growth of three important phyto-pathogenic bacteria: Erwinia carotovora, Clavibacter michiganensis sp. michiganensis and Xanthomonas axonopodis by cell-free extracts from submerged cultures of two strains of Enterococcus sp. was tested. Study Design: A complete randomized experimental design with factorial fix was used to evaluate the efficiency of growth inhibition against the phytopathogenic bacteria. Place and Duration of Study: Laboratory of Bioprocesses, Department of Food Science and Technology, School of Chemistry, Universidad Autonoma de Coahuila, Mexico, between December 2011 and July 2012. Methodology: Enterococci strains were isolated from goat milk, buttermilk and whey by typical microbiological procedures and primarily identified based on biochemical tests. Strains were subsequently activated in MRS broth and cells were separated by centrifugation and filtration. Cell-free extracts were tested against plant pathogenic bacteria to determine their growth inhibition potential. Results: Strains of Enterococcus MII-1 and MIV-2 were able to inhibit the growth of three pathogenic bacteria, demonstrating to be an attractive alternative for biological control assays. Conclusion: The cell-free extracts of Enterococcus spp. show inhibition potential to inhibit phytopathogenic bacteria that cause diseases in horticultural crops. Further studies are needed to completely evidence the high potential of use of cell-free extracts from Enterococcus MII-1 and MIV-2.

Compuestos prebióticos: de las moléculas al ser humano / Prebiotic compounds: from molecules to human beings

Según la definición otorgada por la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO), los prebióticos son componentes no vivos de los alimentos que confieren un beneficio saludable al huésped, asociado con la modulación de la microbiota. Los compuestos prebióticos incluyen oligosacáridos (fructooligosácaridos, galactooligosacáridos, xylooligosacáridos, pecticoligosacáridos), lactosacarosa, azúcares-alcoholes, glucooligosacáridos, levanos o fructanos, almidón resistente, xylosacáridos, entre otros. Los procesos de recuperación, síntesis y/o purificación son específicos para cada grupo. El metabolismo de la microflora produce la formación de gases como H2, CO2 y CH4, y compuestos orgánicos (ácidos grasos de cadena corta y etanol) como producto de la fermentación de prebióticos. Los efectos observados por acción de los prebióticos impactan en la salud del consumidor y pueden manifestarse de forma localizada como aumento de la masa fecal, de la absorción colónica de algunos minerales y de la síntesis de ácido fólico. También, pueden observarse de forma sistémica con la disminución de colesterol, triglicéridos, amonio, urea, entre otras actividades. Una de las aplicaciones con mayor potencial de los estudios de pre y probióticos, es la formulación de alimentos simbióticos; así mismo, los prebióticos prometen cumplir con las necesidades actuales de los consumidores, quienes demandan alimentos funcionales.

According to the definition given by the United Nations Food and Agriculture Organization (FAO), prebiotics are non live components of food that grant a health benefit to the host, associated with the modulation the intestinal microbiota. Prebiotic compounds include, among others, oligosaccharides (fructooligosaccharides, galactooligosaccharides, xylooligosaccharides, pecticooligosaccharides), lactosaccharose, sugar-alcohols, glucooligosccharides, levans or fructans, resistant starch, and xylosaccharides. The recovery, synthesis and/or purification processes are specific for each group. Microflora metabolism produces formation of gases such as H2, CO2 and CH4, and organic compounds (short chain fatty acids and ethanol) as products of prebiotic fermentation. The effects on the health of the consumer produced by the action of the prebiotics can be manifested locally, as by an increase of fecal mass, colon absorption of some minerals, and folic acid synthesis. They can also be observed systemically, as by a decrease of cholesterol, triglycerides, ammonium, and urea, among other activities. One of the applications with the greatest potential in the study of pre and probiotics is the formulation of symbiotic food; probiotics also promise to fulfill the present needs of comsumers, who demand functional food.